هدف: جنسیت در پستانداران بواسطه وجود و یا عدم ژن Sry روی کروموزوم جنسی Y تعیین می شود. بنابراین محیطی که باعث جداسازی اسپرمهای حامل X,Y شود و روشی که بتواند ژن Sry را روی کروموزوم Y شناسایی نماید، امکان تعیین جنسیت را فراهم می آورد.مواد و روشها: این مساله بدان جهت حائز اهمیت است که بیماریهای وابسته به X روی کروموزوم Y آلل متقابل ندارند و این بیماریها در جنس مذکر شایع ترند، بر این اساس جداسازی اسپرمهای X و Y و لقاح آزمایشگاهی در موش و دستیابی به جنس مورد نظر در این تحقیق با استفاده از Puresperm که جدیدا برای شستشوی اسپرم بکار می رود مورد توجه قرار گرفت. به این منظور یک شیب غلظتی 8 لایه ای از 84%-35% با اختلاف 7% با محیط جدا کننده Puresperm تهیه و پس از قرار دادن مایع منی بر روی اولین لایه سانتریفوژ شد. اسپرمهای حاصل از دو لایه 35% و 84% و همچنین گروه کنترل که پردازش در آن صورت نگرفته بود جهت انجام لقاح آزمایشگاهی مورد استفاده قرار گرفتند. جنین های 4-2 سلولی با روش Multiplex PCR برای ژن Sry مورد ارزیابی قرار گرفتند.یافته ها: نتایج PCR نشان داد که 80% جنین ها در شیب غلظتی 84% ماده بودند در صورتی که این جنین ها در گروه کنترل 2/47% بودند (P<0.005) و در شیب غلظتی 35% میزان 7/76% از جنین ها مذکر بودند و این میزان در گروه کنترل 8/52% بود (P<0.05).نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که می توان از شیب غلظتی Puresperm برای جداسازی اسپرمهای Y,X در مدل موشی استفاده کرد.